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      • 豬肝微粒體的規(guī)?;苽?、活性鑒定與長期保存策略

        2025-11-17 一、規(guī)?;苽洳呗越M織采集與預(yù)處理選擇健康成年豬,迅速剖取肝臟后立即用預(yù)冷的生理鹽水或勻漿介質(zhì)(如含0.1mmol/LEDTA的0.25mol/L蔗糖-Tris-HCl緩沖液,pH7.4)沖洗,去除殘留血液和結(jié)締組織。肝臟剪碎后按1:3-1:5(w/v)比例加入緩沖液,使用勻漿器在低溫下勻漿至無可見顆粒,制成肝勻漿。差速離心分離將勻漿液在4℃條件下進(jìn)行梯度離心:第一步離心:600-1000g離心5-10分鐘,去除細(xì)胞核、線粒體等沉淀,收集上清液。第二步離心:將上清液于10,0...
      • 微粒體定制系列(九)——兔肝微粒體Rabbit Liver Microsomes

        2025-11-12 引言歡迎大家來到#齊氏生物##微粒體#定制系列短文,兔肝微粒體((RabbitLiverMicrosomes)因其在代謝特征上與人類較高的相似性,尤其對睪酮的羥基化代謝模式(主要產(chǎn)生6β-羥基睪酮)與人類高度一致,這使其成為研究經(jīng)CYP3A4和CYP2C代謝藥物的理想模型。一、兔肝微粒體RabbitLiverMicrosomes作為體外藥物代謝研究工具,兔肝微粒體(RabbitLiverMicrosomes)是兔肝組織經(jīng)勻漿和差速離心后獲得的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡結(jié)構(gòu),富含Ⅰ相代謝酶(如...
      • “修復(fù)者”TA102的低變之謎

        2025-10-31 引言上個月在嘉興的藥物安評毒理年會上,齊氏生物團(tuán)隊(duì)和多位老師聊到#TA102菌株#,大家一致反映TA102在Ames試驗(yàn)中表現(xiàn)出的“不敏感”,即回復(fù)突變率“較低”甚至個別試驗(yàn)沒有突變。針對這個問題,今天從遺傳構(gòu)造和檢測原理角度淺談一下,揭示其背后的“清潔工”機(jī)制,并提供相關(guān)解決思路,希望給同行老師們提供一些參考。在Ames試驗(yàn)中觀察到TA102菌株的自發(fā)回變菌落數(shù)(即突變率)相對“較低”,其實(shí)是一個常見的現(xiàn)象。這并非意味著TA102不敏感,而是由其獨(dú)特的遺傳構(gòu)造和檢測原理決定...
      • 拯救你的原代細(xì)胞:從識別鉀離子毒性開始

        2025-10-30 引言開學(xué)以來,陸續(xù)收到細(xì)胞群(QQ:386500167)里關(guān)于細(xì)胞凋亡的咨詢,情形很類似,大概原代細(xì)胞剛開始培養(yǎng)不錯,但在1-2天內(nèi)發(fā)生大面積凋亡。今天從鉀離子過高的角度,詳細(xì)解釋下導(dǎo)致這種“延遲性”的凋亡,并提供一套完整的排查思路和解決方案,供大家參考!為什么鉀離子過高會導(dǎo)致“延遲性”大面積凋亡?原代細(xì)胞不像永生化細(xì)胞系那樣耐受性強(qiáng),它們對微環(huán)境的變化極其敏感。鉀離子的影響不是像消毒劑那樣瞬間殺滅,而是通過破壞細(xì)胞的基本穩(wěn)態(tài),最終觸發(fā)凋亡程序。這個過程需要時間,從而表現(xiàn)為“...
      • 一文與您分享成纖維抑制劑的正確使用方法

        2025-10-23 成纖維抑制劑能有效阻止或延緩不溶性纖維狀沉淀物(如硅酸鹽、碳酸鈣、金屬氫氧化物等)的形成與聚集,廣泛應(yīng)用于反滲透系統(tǒng)阻垢、實(shí)驗(yàn)室樣品防凝膠化、細(xì)胞培養(yǎng)基穩(wěn)定及高濃度溶液儲存等場景。然而,若使用不當(dāng),不僅難以發(fā)揮功效,還可能干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)或造成設(shè)備損傷。掌握成纖維抑制劑正確使用方法,是實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的核心。一、明確目標(biāo),選對類型成纖維抑制劑種類繁多,作用機(jī)制各異。常見的有聚丙烯酸類、膦酸鹽類、有機(jī)磷酸酯類及天然聚合物(如檸檬酸鹽)。使用前需明確抑制對象:針對硅垢應(yīng)選用硅分散劑,防鈣垢則...
      • 纖維細(xì)胞試劑盒的工作原理與獨(dú)特優(yōu)勢

        2025-10-22 纖維細(xì)胞試劑盒,尤其是基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)原理的試劑盒,是生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中的重要工具,其工作原理與獨(dú)特優(yōu)勢如下:工作原理纖維細(xì)胞試劑盒(以成纖維細(xì)胞生長因子ELISA試劑盒為例)主要基于雙抗體夾心法或競爭法原理工作:雙抗體夾心法:將特異性抗體包被在微孔板上作為固相抗體,加入樣本后,樣本中的抗原(如成纖維細(xì)胞生長因子)與固相抗體結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的特異性抗體,形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌去除未結(jié)合的成分后,加入底物顯色,通過酶標(biāo)儀測定吸光...
      • 人乳腺成纖維細(xì)胞試劑盒是腫瘤研究與藥物篩選的重要工具

        2025-10-16 人乳腺成纖維細(xì)胞是乳腺組織微環(huán)境中的關(guān)鍵間質(zhì)細(xì)胞,參與乳腺發(fā)育、組織修復(fù)及腫瘤微環(huán)境調(diào)控。人乳腺成纖維細(xì)胞試劑盒為科研人員提供了原代細(xì)胞株、專用培養(yǎng)基與配套試劑,大大簡化了細(xì)胞培養(yǎng)流程,成為乳腺生物學(xué)、腫瘤研究與藥物篩選的重要工具。第一步:準(zhǔn)備工作與環(huán)境消毒在生物安全柜內(nèi)操作,提前開啟紫外燈照射30分鐘。實(shí)驗(yàn)人員需穿戴無菌手套、實(shí)驗(yàn)服與口罩。將水浴鍋預(yù)熱至37℃,CO2培養(yǎng)箱設(shè)定為37℃、5%CO2、飽和濕度。檢查試劑盒內(nèi)各組分是否齊全、未過期。第二步:細(xì)胞復(fù)蘇與接種從液氮罐...
      • 微粒體定制系列(八)——豚鼠肝微粒體(Guinea pig liver microsomes)

        2025-09-29 引言歡迎來到#齊氏生物#微粒體定制#系列短文,CYP2D6負(fù)責(zé)代謝約25%人用臨床常用藥物,包括許多抗抑郁藥、抗精神病藥、β-受體阻滯劑等,豚鼠肝微粒體(Guineapiglivermicrosomes)的獨(dú)特作用主要體現(xiàn)在其代謝酶譜與人類的高度相似性上,尤其是經(jīng)由CYP2D6代謝的候選藥物,代謝途徑上與人類更高相似性,這是豚鼠肝微粒體重要的價(jià)值所在。一、豚鼠肝微粒體(Guineapiglivermicrosomes)豚鼠肝微粒體(Guineapiglivermicrosom...
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